内容简介
《分子生物学实验技术/研究生教育“十三五”规划教材》共分两个部分及附录。*部分侧重于分子生物学基本知识及选材的背景知识介绍。部分分为两个方面,一方面为北京林业大学所开综合实验内容,并附有实验线路图及时间安排;二方面为实验室开设过的成熟的实验及目前较为的小RNA分离检测实验。附录部分介绍了分子生物学实验中常用数据、试剂及相关实验资料。
目录
前言
上篇 实验基础知识
第1章 基因工程载体
1.1 质粒载体
1.2 噬菌体载体
1.3 柯斯质粒载体
第2章 基因操作的工具酶
2.1 限制内切酶
2.2 DNA连接酶及其应用
2.3 DNA聚合酶
2.4 逆转录酶(反转录酶)
2.5 修饰工具酶
下篇 综合实验
实验一 pEGFP—N1质粒DNA的提取、鉴定及浓度测定
实验二 聚合酶链式反应(PcR)技术体外扩增EGFP基因
实验三 T载体克隆GFP基因
Ⅰ GFP基因片段与载体连接
Ⅱ 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验四 转化克隆的筛选和鉴定
实验五 外源GFP基因原核表达
实验六 Southern印迹杂交
实验七 SDS一PAGE检测绿色荧光蛋白的原核表达
实验八 绿色荧光蛋白(GFP)的免疫印迹
实验九 植物基因组DNA的提取及含量、纯度检测
Ⅰ 植物基因组DNA的提取(CTAB法)
Ⅱ 植物DNA纯度的鉴定——紫外分光光度计法
Ⅲ 植物DNA相对分子质量的测定——琼脂糖凝胶电泳法
实验十 油菜cDNA文库的构建
Ⅰ 植物组RNA的提取及电泳分析
Ⅱ cDNA文库的构建
实验十一 小分子RNA的分离纯化与鉴定综合实验
Ⅰ 小分子RNA分离、纯化及修饰
Ⅱ 修饰后小RNA的克隆转化及测序
Ⅲ 测序结果的生物信息学分析
Ⅳ microRNAs的表达鉴定(Northern blot)
附录
附录一 分子生物学实验中的常用数据及换算关系
附录二 分子生物学实验中的常用试剂及溶液、缓冲液
附录三 与分子生物学实验相关的实验资料